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亲和层析在纯化工艺中的应用

生物制品圈  · 公众号  · 生物  · 2022-06-02 09:24
亲和层析是应用生物高分子与配基可逆结合的原理,将配基通过共价键牢固结合于载体上而制得的层析系统。这种可逆结合的作用主要是靠生物高分子对它的配基的空间结构的识别。常用的生物亲和关系有酶-底物、底物类似物、抑制剂、激活剂、辅因子,抗体-抗原,激素-受体蛋白、载体蛋白,外源凝集素-多糖、糖蛋白、细胞表面受体,核酸-互补核苷酸序列、组蛋白、核酸结合蛋白等,具有高效、简单、快速的优点,是当前最为理想的分离纯化蛋白的方法(fig.1)。Figure 1亲和层析分离原理亲和填料由三个部分组成的,主要是多孔球形基架,间隔臂及配基,根据配基特异性的不同亲和填料分几种,Ni柱纯化,GST亲和层析介质((GST Agarose),麦芽糖结合蛋白(MBP),FLAG-tag,Protein G,Protein A和Protein L亲和层析介质等。Ni柱应该我们都比较熟悉,用 ………………………………

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