酶介导偶联技术概览

文章预览

      酶介导的位点特异性反应能提供几乎确定的DAR 与偶联位点，是一种有前途的合成均质 ADC的方法，在近年来蓬勃发展。 A 谷氨酰胺转氨酶 谷氨酰胺转氨酶可催化谷氨酰胺侧链与伯胺之间形成共价键，且不能识别糖基化抗体恒定区域中天然存在的谷氨酰胺，这一特性提供了设计特定“谷氨酰胺标签”的机会，现在已发展为多种技术 。            Schibli 团队首先用糖苷酶PNGase F去除 N-糖链，然后用谷氨酰胺转氨酰胺酶处理，使 Q295 处形成异肽键以实现偶联；又对 N297Q 突变体进行谷氨酰胺转酶处理产生在 Q295 和 Q297 处修饰的产物。       Schibli 团队还合作研发了利用 2 步策略合成均相 ADC 的方法。首先除去糖链，使偶联位点Q295 被微生物谷氨酰胺转氨酶特异性识别，并且将含有叠氮化物的连接子连接到抗体上。然后，MMAE 通过 SPAAC 连接到抗体 ………………………………