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如何提高细胞样本的蛋白提取浓度?

爱吃洋芋的酸菜鱼  · 公众号  ·  · 2024-10-17 23:44

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点击👆 爱吃洋芋的酸菜鱼 👇关注,加 ★ 星标 大家好,我是酸菜鱼,今天要跟大家分享的内容是如何提高细胞蛋白的提取浓度?我们知道细胞蛋白提取是我们进行后续蛋白相关实验的重要步骤,细胞蛋白浓度的高低决定了我们能跑WB的次数以及蛋白标化的浓度。但是在实际工作中我们常常遇到提取的细胞浓度偏低或者某个干预组细胞数量明显低于其他组导致提取的蛋白浓度相差过大,这该怎么办呢? 0 1 提高蛋白质提取浓度的策略 (1)优化细胞裂解步骤 a. 选择合适的裂解液 裂解液的选择对蛋白提取的效率和质量有着至关重要的影响。RIPA裂解液是一种常用的强力裂解液,适合用于提取细胞和组织中的蛋白质。它的主要成分包括Tris缓冲液、NaCl、去污剂(如Triton X-100、sodium deoxycholate和SDS)、焦磷酸钠、β-甘油磷酸、EDTA、Na3VO4和peptide inhibitors等。 ………………………………

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