【生化】江南大学许菲团队Angew：同时设计高活性和热稳定性甲基对硫磷水解酶的双焦点工作流程

文章预览

工业发酵生产需要在极端高温和pH值等恶劣条件下高效且稳定的酶，然而，由于天然酶受自然进化的限制，无法满足实际工业应用的条件，此外在设计天然酶来提高稳定性通常会导致催化活性的丧失，反之亦然，即所谓的活性-稳定性权衡，极大地限制了酶生物技术的发展。那么，如何克服酶活性稳定性的权衡，使其兼具高稳定性与高催化活性呢？近日， 江南大学许菲 教授团队 以中温有机磷降解酶——甲基对硫磷水解酶 (MPH) 为模式酶，开发了双重聚焦的计算机设计流程，将定向进化和靶向突变的优势进行结合加速兼具高活性和耐热酶的开发。 作者首先提出了一种三阶段的酶工程策略，通过酶序列位点氨基酸的物化特征提取，聚类分析筛选热点和计算机虚拟突变，经实验验证后选择了7个候选单点突变体。随后，通过多轮的平行迭代突变筛选成功地 ………………………………