煮过放-80℃的蛋白，拿出来解冻后是否需要重新煮一下再上样？为什么呢？

文章预览

众所周知，煮沸的目的是通过高温使蛋白质变性，即破坏其天然的三维结构，使得蛋白质成为线性的、无电荷的多肽链。 这种变性处理增加了蛋白质在后续电泳中的均一性和分辨率。然而，冷冻保存并不会导致蛋白质结构恢复原状，因此， 如果蛋白质已经在煮沸过程中彻底变性，则无需再次煮沸。 图源：网络 但当存在下列情况时，则建议重新煮沸 1、 沉淀或聚集现象 ： 蛋白质样品中出现了颗粒物质或聚集物，这可能会影响电泳的效果。为了保证蛋白质分子处于单一分散状态，重新煮沸处理是一种有效的方法。煮沸过程不仅能使蛋白质进一步变性，还能消除因冷冻引起的物理变化，从而确保样品的一致性。 2、 多次冻融循环的影响 ： 反复的冻融循环可能会导致蛋白质的部分降解或形成微小聚集体，尽管肉眼不易察觉，但在高精度实验中可能会 ………………………………