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qPCR实验,如何让枪头液体残留不了一点?

NIRO科研喵  · 公众号  ·  · 2024-07-23 07:30

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师弟 师姐,你的 qPCR 结果我重复不出来 ,结果误差太大,到底哪有问题呀? 仪器 工程师刚调试过,可以排除。 不会是因为 基因丰度或模板量低 ,这批样品我自己之前包括昨天做了都没有问题,你操作过程有 污染的可能 吗 ? 师姐 师弟 我都是在超净台里面操作的,而且我特意检查了有没有残留的抑制物,用 Nanodrop 测了 OD260/280 没有问题。 那你配体系的时候那 1 μl 的 cDNA 咋加的? 师姐 师弟 就.....往里加呗,这还有讲究 ? 你别不重视 ,1 μl 的体积很小,稍微差一点都有可能影响结果。加样的时候枪头可以伸到液面下一些,也不要没入液面太深,不然液滴有残留实验结果肯定不准。 师姐 师弟 啊?之前真的没想到,我去试试看! 在师姐的指导下,我重做了实验,格外注意了加样的操作,结果真的拿到了满意的曲线图!这周组会终于有数据可以 ………………………………

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