手把手教学｜流式细胞术如何检测细胞周期和凋亡

文章预览

一、细胞周期 细胞周期反映了细胞增殖速度。在这个过程中，细胞的DNA复制并加倍，在分裂结束时平均分配到两个子细胞中去。在细胞周期的不同时相，包括G1/G0期(2C DNA)、S期(介于2C~4C之间)和G2/M(4C DNA)，DNA含量存在差异，用DNA染料(PI是最经典的)进行染色，染料的荧光强度与DNA含量成正比，从荧光强度的变化，可以判断细胞所处的细胞周期时相。结合每个周期时相的细胞数目，可以判断各时相细胞所占百分比，从而判断细胞周期状况。 1. 材料   肿瘤细胞系、15ml 管、EP管、吸头、移液器和400目滤网试剂乙醇、胰酶、1XPBS、细胞周期试剂盒。 2. 实验步骤 ①制备单细胞悬液： 1）使用长满细胞的10厘米培养皿。 2）收集上清至15毫升离心管中。 3）用1XPBS洗涤一次，再次收集至15毫升离心管中。 4）加入1毫升胰酶，静置4分钟，在显微镜下观察细胞消化情况 ………………………………