专栏名称: 科研这点事儿
科普分子生物学知识,关注前沿生物技术,聚焦表观遗传学。
今天看啥  ›  专栏  ›  科研这点事儿

关于载体构建中的FLAG标签

科研这点事儿  · 公众号  ·  · 2024-04-26 05:16
    

文章预览

FLAG标签是最常用的用于检测过表达蛋白的标签 。Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽( DYKDDDDK ),同时载体中构建的 Kozak序列(GCCACC) 使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。 FLAG作为标签蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点: 1.  FLAG作为融合表达标签,其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。 2.  融合FLAG的目的蛋白,可以直接通过FLAG进行亲和层析,此层析为非变性纯化,可以纯化有活性的融合蛋白,并且纯化效率高。 3.  FLAG作为标签蛋白,其可以被抗FLAG的抗体识别,这样就方便通过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。 4.  融合在N端的FLAG,其可以被肠激酶切除(DDDK),从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG ………………………………

原文地址:访问原文地址
快照地址: 访问文章快照
总结与预览地址:访问总结与预览