主要观点总结
本文研究了脓毒症小鼠循环血浆细胞外囊泡（EVs）在神经炎症中的作用。研究发现，EVs被脑细胞摄取并在体内分布。通过注射脓毒症血浆EVs，观察到脑部先天免疫细胞数量显著增加，包括小胶质细胞、浸润的髓源性细胞（如单核细胞和中性粒细胞）。这些细胞增加导致促炎性细胞因子/趋化因子基因表达增加。此外，脓毒症EVs激活小胶质细胞并间接诱导神经元凋亡。机制上，脓毒症EV相关miRNA部分通过TLR7激活小胶质细胞。最后，研究确定了导致神经元损伤的潜在效应因子，并通过功能丧失方法研究了脓毒症EV诱导的体内脑炎症中TLR7和MyD88信号的作用。发现MyD88信号在脓毒症EV诱导的体内脑炎症中起关键作用。
关键观点总结
关键观点1: 实验结果1：脑细胞对EVs的吸收
通过荧光染料PKH26标记HEK293T细胞来源的EVs，发现其在细胞质中被摄取。在体内，通过ICV和IV注射PKH26-293EVs，观察到EVs与包括小胶质细胞和神经元在内的各种脑细胞共定位。
关键观点2: 实验结果2：脓毒症血浆EVs引起脑部炎症
通过ICV注射脓毒症血浆EVs，观察到脑部先天免疫细胞数量显著增加，包括小胶质细胞、浸润的髓源性细胞（如单核细胞和中性粒细胞）。这些细胞的增加伴随着促炎性细胞因子/趋化因子基因的表达增加。
关键观点3: 实验结果3：脓毒症EVs激活小胶质细胞并间接诱导神经元凋亡
脓毒症EVs处理小胶质细胞导致剂量依赖性CXCL2和IL-6生成增加。此外，用脓毒症EVs处理的小胶质细胞培养基（CM）孵育神经元时，观察到神经元细胞死亡，表现为增加的裂解的Caspase-3和Annexin V染色。
关键观点4: 实验结果4：脓毒症EV相关miRNA通过TLR7部分激活小胶质细胞
脓毒症EVs携带的miRNA（如miR-146a-5p、miR-122-5p、miR-34a-5p和miR-145a-5p）在小胶质细胞活化中起作用。抗miR组合处理或TLR7基因敲除可抑制CLP EVs诱导的小胶质细胞活化。
关键观点5: 实验结果5：培养介质的细胞因子谱确定了导致神经元损伤的潜在效应因子
细胞因子阵列分析显示，脓毒症EV处理的小胶质细胞培养基中多种细胞因子和趋化因子上调。这些介质包括E-选择素、IL-12 p40、脂质运载蛋白2等。进一步的分析确定了与神经元损伤相关的潜在效应因子，如LCN2、MMP9等。
关键观点6: 实验结果6：TLR7和MyD88信号在脓毒症EV诱导的体内脑炎症中的作用
虽然体外实验表明TLR7参与脓毒症EV诱导的小胶质细胞活化，但体内实验表明MyD88信号在脓毒症EV诱导的脑部炎症中起关键作用。MyD88基因敲除小鼠在接受脓毒症EVs注射后，脑部先天免疫细胞数量和细胞因子表达明显减少。
文章预览
Chestnut Studying 摘要 Background: Neuroinflammation reportedly plays a critical role in the pathogenesis of sepsis-associated encephalopathy (SAE). We previously reported that circulating plasma extracellular vesicles (EVs) from septic mice are proinflammatory. In the current study, we tested the role of sepsis plasma EVs in neuroinflammation. Methods: To track EVs in cells and tissues, HEK293T cell-derived EVs were labeled with the fluorescent dye PKH26. Cecal ligation and puncture (CLP) was conducted to model polymicrobial sepsis in mice. Plasma EVs were isolated by ultracentrifugation and their role in promoting neuronal inflammation was tested following intracerebroventricular (ICV) injection. miRNA inhibitors (anti-miR-146a, -122, -34a, and -145a) were applied to determine the effects of EV cargo miRNAs in the brain. A cytokine array was performed to profile microglia-released protein mediators. TLR7- or MyD88-knockout (KO) mice were utilized to determine the underl
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