【DeepSeek专栏】Nat Biotechnol | Cas13d的表达水平是影响旁切活性的关键

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温馨提示： 本文由DeepSeek生成初稿后经科学编辑加工修改所成，请读者注意甄别科学细节！ CRISPR-Cas13d作为RNA靶向工具，因其高效性和特异性在基因治疗、转录组编辑等领域展现出巨大潜力。然而，其非靶向的“旁切”现象可能引发细胞毒性，阻碍临床应用。尽管早期研究在病毒递送系统中未检测到显著的旁切活性，但近期高剂量转染实验表明，Cas13d的高表达可能导致全局RNA降解。 近日，纽约大学 Neville E. Sanjana 团队在 Nature Biotechnology 上发表了文章 Precise RNA targeting with CRISPR–Cas13d 。 本研究 系统探究了Cas13d表达水平与旁切活性的关系，并提出了优化策略。 研究团队首先通过构建可诱导表达Cas13d-P2A-mCherry的质粒，比较了不同递送方式 （转染与慢病毒转导） 对Cas13d表达的影响。结果显示，转染高剂量质粒 （250-500 ng） 时，mCherry荧光强度是病毒转导 ………………………………