蛋白质定量——Biuret Test

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蛋白质定量——Biuret Test 译自Chem-Station网站日本版 原文链接：タンパク質の定量法―ビューレット法 Protein Quantification – Biuret Test 翻译：炸鸡 原理 即古典比色法。 由三个以上氨基酸连接在一起的三肽或者寡肽 ・ 蛋白质在碱性条件下与 Cu 2+ 反应时，肽键会形成红紫色的 Cu + 络合物。肽键越多显的颜色越深。在 540 nm 波长下测定吸光度，再根据校准曲线算出含量。生成的络合物与双缩脲 - 铜络合物类似，故得名双缩脲试验。 此法改良后就是Lowry法和BCA法。 优点 难以受到蛋白质组成差异的影响 操作简便 难以受到界面活性剂・脂质的影响 缺点 测定范围为1-10 mg/mL，灵敏度低 显色会受到高浓度的三羟甲基氨基甲烷和铵离子的影响 方法 Biuret试剂的制作方法 将CuSO 4 ･5H 2 O（3 g）、酒石酸钾钠（12 g）、超纯水（500 mL）混合在一起，边搅拌边加入10% NaOH（ ………………………………