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梯度洗脱 作为最常用的洗脱方法,相比每一个小伙伴们都不会陌生,但是在实际应用过程中,我们往往需要对梯度洗脱的条件进行优化来改善 分离度、降低峰宽或缩短分离时间等 。那么我们如何对梯度洗脱条件进行优化呢?下面让我们来一同了解。 一、梯度优化原理 1. 梯度陡度(T)对梯度洗脱的影响 首先,我们要引入梯度陡度(T)的概念, 梯度陡度是单位时间内梯度变化的程度 ,其具体公式如下图所示。 我们要注意的是 T越大,k(保留因子)越小,在N(理论塔板数)、ɑ(选择性)不变的情况下,R(分离度)越小。也就是说梯度陡度变化越大,分离效果越差。 图(a)、(b)、(c)、(d)分别是5min、10min、20min、40min之内组分B比例由10%升高到60%的结果。我们可以发现梯度陡度越小,分离度越好。 2.强洗脱溶剂组分(B)浓度变化范围的影响 注意: a. 样
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