实验解析｜大分子蛋白的WB实验有什么注意事项？

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Western Blot作为生物学研究中常用的蛋白质检测技术，在大分子蛋白检测方面有其独特的要点与挑战。了解并掌握这些注意事项，对于获得准确、可靠的实验结果至关重要。 1、电泳过程要点 1）对于大分子蛋白，首先要选择合适的凝胶浓度。一般来说，较低浓度的凝胶（如6%-8%）更适合分离大分子蛋白，因为高浓度凝胶的孔径较小，可能会阻碍大分子蛋白的迁移，导致条带模糊或无法有效分离。 2）一般来说，大分子蛋白迁移速度相对较慢，过高的电压可能会使蛋白条带变形或出现拖尾现象。通常采用较低电压（80V左右）长时间电泳的方式，以保证大分子蛋白能够充分分离且条带整齐。 2、转膜步骤关键 1）大分子蛋白一般选用PVDF膜，通常PVDF膜比NC膜更适合大分子蛋白的转膜，因为其具有更好的机械强度和蛋白结合能力。 2）湿转转膜的过程中一般采 ………………………………