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手把手教学|一文读懂DNA提取及电泳鉴定

实验老司机  · 公众号  ·  · 2024-10-23 07:00
    

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DNA提取的目的是从细胞或组织中分离并纯化DNA。通常包括细胞裂解、去除蛋白质和其他杂质、以及DNA的沉淀和纯化。 一、离心柱法提取DNA 步骤 1)将组织或细胞悬液加入裂解缓冲液,涡旋混匀。裂解缓冲液中含有变性剂(如胍异硫氰酸盐),可以有效地裂解细胞和组织,破坏细胞膜和细胞核膜,同时使核酸与蛋白质分离。 2)将裂解液转移到DNA Spin Column中,离心收集流穿液。这个步骤涉及到将裂解液通过一个特殊的膜过滤,该膜具有特定的孔径,允许小分子如RNA和蛋白质通过,而DNA由于其较大的分子尺寸被截留在膜上。 3)用Washing Buffer洗涤DNA柱膜。Washing buffer中含有乙醇和盐,可以去除杂质和蛋白质,保留DNA在柱膜上。  4)将Elution Buffer加入到柱中,离心收集纯化的DNA。Elution Buffer是低盐缓冲液,能有效洗脱柱膜上结合的DNA,得到纯化的基因组DNA ………………………………

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