实验解析｜ELISA实验经验总结

主要观点总结

本文介绍了ELISA实验的基本原理和步骤，汇总了关于ELISA实验出现空白背景高的常见原因和处理方法的经验心得。包括洗板不干净、显色液变质、试剂稀释有误等常见问题及相应的解决方法。

关键观点总结

关键观点1: ELISA实验简介

ELISA是一种基于免疫学原理的实验方法，用于检测和定量分析样品中的特定抗原或抗体。该实验包括涂覆、阻断、样品加入、洗涤、探针加入、底物加入等步骤。

关键观点2: ELISA实验空白背景高的原因及处理方法

常见原因包括洗板不干净、显色液变质、试剂稀释有误等。解决方法包括充分洗涤、使用新的试剂盒、按照说明书推荐稀释抗体、确保试剂盒组分平衡、使用新鲜蒸馏水等。

关键观点3: 实验操作的注意事项

实验操作需注意避免交叉污染，使用一次性移液枪头，确保恒温箱温度稳定在37℃，按照说明书的反应时间进行孵育等。

文章预览

前置知识 ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，酶联免疫吸附试验）是一种常用的实验技术，用于检测和定量分析样品中特定抗原或抗体的存在。ELISA是基于免疫学原理的一种高灵敏度和高特异性的实验方法。 ELISA实验通常包括以下步骤： 1. 涂覆：将待检测的抗原或抗体溶液加入到微孔板（通常是96孔板）中，并在孔板表面上形成一层固定的抗原或抗体。这个过程被称为涂覆。 2. 阻断：为了防止非特异性结合，需要在涂覆后加入一种阻断剂，例如牛血清蛋白（BSA）或牛奶粉，以覆盖孔板上未被固定的表面。阻断剂可以减少非特异性结合和降低背景信号。 3. 样品加入：将待测样品加入到微孔板中，样品中的目标抗原或抗体与固定在孔板上的抗体或抗原相互作用。 4. 洗涤：通过反复洗涤孔板，去除未结合的物质，以减少背景信号。 5. 探针加入：加入与待 ………………………………