【实验步骤】细菌生长和细菌外膜（BOM）提取

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细菌生长和细菌外膜（BOM）提取 将pUC19质粒转入减毒大肠杆菌BL21 （DE3）中获得氨苄西林抗性。参照前文方法提取BOM在37℃以180 rpm振荡将细菌接种到250 mL LB培养基中。当OD600达到1.2-1.4时，在4℃下8000 rpm离心10 min收集细菌，用冷PBS洗涤3次。 将约1 g细菌颗粒分散于20 mL含溶菌酶的Tris HCl缓冲液（pH 8.0）和SDS中，在冰浴中超声处理15 min后冻干。将干燥后的细菌粉在氯仿-甲醇-水（体积比30:15:1）溶液中振荡1 h，然后通过0.45µm氟化钠滤器，收集含BOM的滤液进行真空干燥。然后将BOM分散在PBS中，通过BCA试验评估BOM的蛋白浓度。 参考文献： Self-Oxygenated Biomimetic Nanozyme for Tumor Catalytic Immunotherapy Advanced Functional Materials  ( IF 18.5 )  Pub Date : 2024-10-31 DOI: 10.1002/adfm.202411103 ………………………………