NCBI在线引物设计 | 步骤简单，包教包会！

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NCBI在线引物设计步骤分享！ 这里以human p53为例进行引物设计，具体步骤如下： 1）寻找基因序列 网站 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/?term= ①选择核苷酸数据库，在检索框输入基因+物种+mRNA，点击search。 ②左侧类别下，选择 mRNA。 ③以下条目就是我们要找的p53 human mRNA。 ④单击选择FASTA序列格式。 ⑤在右侧的序列分析工具栏，点击“pick primers”即可跳转到Primer-BLAST页面。 2）参数设置 ①选择PCR模板区； ②输入FASTA格式的序列或Accession Number，或者点击“选择文件”载入； ③可设置正向引物和反向引物的起始和终止位置； ④选择引物参数区； ⑤若你自己设计好了引物，可在此输入引物验证引物好坏； ⑥可输入PCR产物的大小和Tm值参数。 ⑦内含子/外显子选择区：框内可选择引物设计是否跨越内含子。 ⑧引物特异性验证区：六种数据库可供选择，推荐使 ………………………………