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GenScript这个在线工具可以设计RT-PCR（TaqMan）实验中的引物和探针。这里我们 以“human p53”为例进行mRNA引物设计 。 1）序列查询 进入NCBI网站 （https://www.ncbi.nlm.nih.gov/） 后，数据库选择核苷酸Nucleotide，检索框内输入基因+物种+mRNA--p53 human mRNA，点击Search开始检索。 下一级页面中，左侧菜单栏（如下图所示）单击选择mRNA选项。 点击进入下一级页面。 往下拉点击CDS。 点击页面右下角FASTA。 复制序列号。 2）GenScript在线设计引物 进入Genscript （https://www.genscript.com/tools/real-time-pcr-tagman-primer-design-tool#） 网站 （没有注册Genscript账号的先完成账号注册， 简单填个信息就能完成注册），选择好物种，选择引物设计是否需要跨越内含子设计。 当选择“Pick Primer/Probe Crossing Exon Junction”时，必须定义外显子区域。如果仅提供原始序列，序列将被映射到当前的人类、
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