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手把手教学|使用ImageJ处理WB条带和后续数据分析方法

实验老司机  · 公众号  ·  · 2024-10-21 07:00
    

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Western Blot又称蛋白质免疫印迹,其原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的样品进行着色,进而根据着色位置及着色深度判断特定蛋白在组织或细胞中的表达情况。 ImageJ 是一款功能强大的开源图像处理和分析软件,常用来分析对实验结果进行定量分析。在wb实验中, ImageJ 可以通过蛋白表达的相对强度,进行半定量的分析。以下详细介绍使ImageJ处理wb条带和后续数据分析方法。 1、打开ImageJ,点击File-Open ,选中目的条带。 2、使用ImageJ打开WB图像,并转换为8位灰度图像(Image——Type—— 8-bit) 3、去除背景阴影,Process——Subtract Backfround,在弹出的对话框中Polling ball radius 填50,并勾选Light background,再点击OK。 4、 设置测量参数 Analyz——Set Measurements ,选择所需的统计数据,如面积(Area)、平均灰度值(Mean gray value)、最小和最大灰度值(Min & max gray ………………………………

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