手把手教学｜基因过表达实验流程——从病毒制备到细胞感染

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转染是细胞生物学研究的重要技术，是指将外源性的DNA、RNA等导入目的细胞的过程，主要用于调控基因表达，从而研究基因功能。以下以研究肾缺血再灌注损伤模型中慢病毒包装过表达肾小管上皮细胞（HK-2细胞）线粒体分裂基因drp1为例介绍转染相关实验步骤。 一、质粒提取（辅助质粒PMD2.G、PSPAX2，目的质粒） 实验步骤： 1、配制LB固体培养基（加氨苄）：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，琼脂粉15g，加入1000 mL水。需高压灭菌，待温度降至40-50℃时，加入适量氨苄，混匀后倒板。 2、划线：待板中培养基冷却至室温后，将接种环用酒精灯灭菌后在酒精灯周围蘸取菌液并依次划线，然后置于37℃培养箱培养。 3、摇菌：挑去板中出现的单个菌落至装有15 mL LB液体培养基的离心管中，瓶盖适当拧松，置于37℃摇床上200rpm 12-16h。 4、离心：将含有菌液的离 ………………………………