#qPCR实验，怎么避雷，引物溶解曲线、Ct值常见问题，在线等，挺急的！！！

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近期有很多小伙伴反馈说，熔解曲线和Ct值经常出现一些问题又没法很好的解决，所以针对这些问题，专门对熔解曲线和Ct值问题进行剖析，还有前期提到的RNA问题。[跳跳] 对于引物熔解曲线和Ct值问题，感兴趣可以浏览这篇文章《 qPCR实验中，除了Ct值，还需要看扩增曲线和溶解曲线吗？ 》；而RNA问题可以浏览这篇文章《 不跑电泳就谈RNA质量好坏的，都是耍流氓！ 》。 其实分析实验和选择内参的依据都是从原理入手，仔细分析每一步可能的影响因素，内参的选择需要先知道内参的本质，再分析处理可能带来的影响。对于引物内参可浏览这篇文章《 一图读懂多重qPCR内参设计及制备 》。 1#. β-actin: β-actin是肌动蛋白的一种，存在于所有真核细胞中且高度保守，细胞分化与运动时含量变化; 2#. GAPDH: 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)是糖酵解、糖异生及光合作 ………………………………