实验干货: 小鼠肝脏原代细胞的分离和培养

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肝实质细胞 原代肝细胞广泛用于肝脏体外研究，特别是在糖脂代谢或肝脏相关的疾病研究中。 原代肝细胞的培养可用于探索肝脏在物质代谢中的作用，阐明各种肝脏疾病的发病机制，对研发新药物也至关重要。因此获得高活性和形态完整的原代肝细胞是进行肝脏体外研究的基础。 实验前准备 1. 样品信息 8-12周龄小鼠 2. 试剂和耗材  1）Liberase Stock Solution 分离所用的Liberase终浓度为25 μg/mL。 2）Perfusion Buffer 注：EGTA可作为EDTA的替代品。 3） Digestion Buffer 4） Maintenance Media 5） Plating Media 实验操作 1. 准备： 1）将perfusion buffer 和 digestion buffer 42℃预热； 2）准备2个50mL EP管（标为DB-chilled和DB-liberase），每个管中加入10mL Digestion buffer； 将DB-chilled置于冰上； DB-liberase添加250 uL Liberase solution，并放在水浴锅中预热； 3） 打开蠕动泵，首先灌70%乙醇，空气灌30-60 ………………………………