清华＆北大《Nat. Commun.》：利用SNAP-MS技术提高蛋白质纯化效率有效表征天然蛋白质复合物

主要观点总结

本文报道了利用可溶性水凝胶亲和基质和非变性串级质谱高效纯化表征天然蛋白质复合物的技术方案SNAP-MS。针对传统蛋白质纯化流程中的问题，SNAP-MS通过溶解珠基质策略提高了目标蛋白的回收效率和纯化质量，优化了传统蛋白质纯化流程。该技术在保持蛋白质活性和结构完整性方面具有明显优势，适用于复杂生物样本处理。文章还介绍了SNAP-MS在纯化和表征血液样本中的内源性蛋白质复合物、筛选最佳表达和制备条件以及使用传统工具进行结构表征等方面的应用。

关键观点总结

关键观点1: 研究背景

蛋白质复合物在生物过程中的重要作用以及现有技术对其表征的局限性。

关键观点2: 研究目的

开发一种高效、高特异性的蛋白质复合物纯化技术，以提高对天然蛋白质复合物的表征能力。

关键观点3: 研究方法

利用可溶性水凝胶亲和基质和非变性串级质谱技术，开发SNAP-MS技术方案。通过溶解珠基质策略，提高目标蛋白的回收效率和纯化质量。

关键观点4: 研究成果

成功开发出SNAP-MS技术方案，并在多种实验中对不同蛋白质复合物进行了纯化和表征。结果显示，SNAP-MS技术显著提高目标蛋白的回收率和纯度，并保持了蛋白质的结构完整性。

关键观点5: 技术应用

SNAP-MS技术在生物样本中的天然蛋白质复合物表征、疾病诊断和生物标志物的开发等领域具有广泛的应用前景。

文章预览

蛋白质复合物对于在各种生命过程中执行生物功能至关重要，分析这些完整的蛋白质复合物对于在分子水平上理解生物过程至关重要。用于该目标的非变性质谱、冷冻电镜等化学物理表征手段受限于前端富集纯化效率，天然样本中存在的糖基化等复杂修饰造成蛋白质复合物的高异质性，导致谱学信号难以解析。因此，这些问题严重影响对低输入量天然蛋白复合物的表征能力。 针对此问题， 来自北京大学王冠博/清华大学王建斌团队 报道了利用可溶性水凝胶亲和基质和非变性串级质谱高效纯化表征天然蛋白质复合物的技术方案SNAP-MS (Stationary-phase-dissolvable Native Affinity Purification and Mass Spectrometric characterization）。在捕获目标的回收过程中，SNAP-MS用基质溶解取代了传统的洗脱，从而能够使用高亲和力的诱饵-目标对并消除了间隙空隙。纯化的完整蛋白质复 ………………………………