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一文告诉你如何高效制备感受态细胞

生命科学技术摘集  · 公众号  ·  · 2024-11-06 08:51
    

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1  感受态细胞定义 感受态细胞 ( competent cell )是大肠杆菌( Escherichia coli )经过特殊(例如电击、 CaCl 2 、 RbCl(KCl 等)处理后, 细胞膜通 透性发生改变进而能够允许外源 DNA 得以进入细胞  [1-2] 。大肠杆菌结构比较简单(细胞壁、细胞质、核糖体、质粒和拟核等),其细胞质中的 质粒 常用作基因工程的运载载体,且它具备 全基因组测序的优势 ,已经成为 完善的基因克隆表达系统 ,已经被美国 FDA 批准为安全的基因工程受体生物,目前也是生命科学领域用于基因克隆最常见的生物受体工具  [3] 。 (图 1  大肠杆菌实现基因克隆的基本示意图) 2 CaCl2改变膜通透性 细菌的细胞壁通透性都是较高的,而膜结构是以选择透过性,是半一种半透膜。因此,要改变细菌对外界 DNA 的摄入,主要是改变细菌细胞膜(生物细胞膜具有相似性)通透性,因为 ………………………………

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