蹊跷！空白样品为何会出现鬼峰？

主要观点总结

本文主要讨论了在进行溶剂的空白注射时，色谱基线上会出现离散的峰，可能干扰分析物的峰，增加色谱图的复杂性。文章强调了理解这一现象的关键在于了解HPLC梯度的工作机制，并列举了常见的污染源和相应的解决方案。

关键观点总结

关键观点1: 溶剂的空白注射会在色谱基线上产生离散的峰，干扰分析。

这是因为在反相HPLC梯度的开始阶段，溶剂的洗脱能力较弱，任何略具疏水性的物质可能会被捕获在分析柱的柱头处。随着梯度进行，这些物质会被洗脱并可能在色谱图上表现为峰。

关键观点2: HPLC梯度工作中的洗脱强度和聚焦现象是决定梯度分析中分析物峰宽的主要因素。

梯度分析中，强溶剂从柱入口进入，逐渐将弱溶剂从色谱柱中挤出，引发进一步的“聚焦”过程，即分析物带被压缩。

关键观点3: 污染物也是产生离散峰的一个重要原因。

污染物会被捕获并在梯度分析过程中聚焦，最终在空白色谱图中表现为离散的峰。常见的污染源包括用于HPLC的水、塑化剂、pH计探针、有机溶剂、试剂和添加剂、空气峰、系统污染、色谱柱泄露等。

关键观点4: 为了减少鬼峰的出现，需要注意实验室操作的细节。

例如确保所有水生产装置的良好维护，定期清洗溶剂储存瓶，避免使用含表面活性剂的洗涤剂；使用充分清洗过的玻璃器皿制备溶剂，避免在制备溶剂和使用塑料设备；购买高质量的溶剂等。

文章预览

我想我们都遇到过这个问题。在进行 溶剂的空白注射（或无体积的虚拟注射） 时，色谱 基线上会出现离散的峰，可能干扰分析物的峰，或者增加色谱图的复杂性 ，尤其是在进行痕量分析时。 显然这是一个不理想的情况，而且这种现象可能很难理解或排查。毕竟我们没有注入任何东西， 为什么空白色谱图中会出现峰呢？ 要理解这一现象的关键在于了解 HPLC梯度的工作机制 。 在 反相HPLC梯度的开始阶段，溶剂的洗脱能力较弱 ——也就是说，溶剂中只含有少量的有机改性剂，而有机改性剂是较强的溶剂。因此， 溶剂中任何略具疏水性的物质（即更容易被固定相吸引的物质）可能会被“捕获”在分析柱的柱头处 （如图1所示）。 图1：在HPLC梯度开始阶段，疏水性分析物被捕获在分析柱柱头 随着梯度进行，溶剂系统的洗脱强度增加， 分析物带开始在固 ………………………………