实验干货---如何高效提取RNA（Trizol法）

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RNA提取常用的方法是Trizol法提取。 它的原理是在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。 加入氯仿离心后，裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。 水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后，用乙醇可从中间相沉淀得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。 实验步骤: 1. 细胞裂解或组织匀浆。 a. 贴壁细胞 吸尽培养液，每 10 平方厘米细胞加入 1ml Trizol 。水平放置片刻，确保全部裂解后，用移液枪充分吹打，使细胞脱落（贴壁牢固的细胞可用细胞刮刀剥离细胞）； 将含有细胞的裂解液转移至离心管中，反复吹打直至无明显沉淀； b. 悬浮细胞 8000 g 4℃ 2 min 离心，收集细胞，吸尽液体，每 10 7 个细胞加入 1ml Trizol 。移液枪反复吹打直至无明显沉淀。 c. 组织 每 50 mg-80 mg 组织加入 1m ………………………………