中检院|circRNA反向高效液相色谱纯度分析及降解产物免疫原性

文章预览

在circRNA原液合成中，产物相关杂质主要包括： 线性precusor RNA ， circRNA断裂而成的nicked circRNA ， 掉落的Introns ， 包含多个CDS的线性或者环状的串联高分子量RNA （HMW） ， circRNA聚集体 （Aggregates） 。 这些杂质的鉴定和分离一直是circRNA疫苗产业化过程的阵痛所在 ，尤其是一些具有相似分子量，不同结构的杂质分子，例如，circRNA和nicked RNA。2023年4月份，美国药典 （USP） 发布了第二版《mRNA 疫苗质量分析方法》指南草案，涵盖线性mRNA整条生产线的分析方法，包括质粒DNA，mRNA原液 （Drug Substance） ，mRNA制剂 （Drug Product） 。然而，WHO和各国药监局尚未发布任何针对circRNA疫苗的质量分析指导草案。 与线性mRNA相比，闭环的circRNA可避免核酸外切酶介导的降解，在哺乳动物细胞中表现出更长的半衰期，表达蛋白的持续时间也更长。可是，这并不意味着circRNA永 ………………………………