"Nanopore"纳米孔测序解析

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Nanopore是一种单分子、实时测序的新一代测序方法，其以单分子DNA(RNA)通过生物纳米孔(ONT)的电流变化推测碱基组成而进行测序。    01    Nanopore测序原理 核心部件是一个由蛋白质构成的纳米级的小孔，将纳米孔蛋白固定在电阻膜上后，小孔中就会有电流通过，再利用动力蛋白牵引核酸穿过纳米孔，当核酸通过纳米孔时使电荷发生变化，从而引起电阻膜上电流的变化。 由于纳米孔的直径非常细小，仅允许单个核酸聚合物通过，而ATCGU单个碱基的带电性质不一样，因此通过蛋白纳米孔时对电流产生的干扰不同，通过实时监测并解码这些电流信号便可确定碱基序列，从而实现测序。 1、基本装置  ①纳米孔 一般称为Reader，可以嵌入到细胞膜中作为离子或分子通道的跨膜蛋白，具有天然的蛋白纳米孔。 Reader蛋白是通过基因工程将天然能形成穿模孔的跨膜 ………………………………