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“原核表达大揭秘:如何选择合适的载体,让你的实验事半功倍!”

生命科学技术摘集  · 公众号  ·  · 2024-11-14 08:57

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表达载体是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够表达的载体。 原核表达载体的主要功能元件: 启动子、转录终止子(防止克隆的外源基因表达干扰载体的稳定性)、核糖体结合位点。 启动子类型: 根据作用方式及功能分类 ①组成型启动子 ②组织特异启动子 ③诱导型启动子。 最常见的pET系列载体 pET载体中,目标基因克隆到T7噬菌体强转录和翻译信号控制之下,并通过在宿主细胞提供T7 RNA聚合酶来诱导表达。 pET载体优点 ①是原核蛋白表达用最多的系统; ②在任何大肠杆菌表达系统中, 基础表达水平最低; ③真正的调节表达水平的 乳糖操纵子控制; ④提供各种不同 融合标签和表达系统配置; ⑤ 可溶性蛋白生产、二硫键形成、蛋白外运和多肽生产 等专用载体和宿主菌; 原核 ………………………………

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