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qPCR实验和WB实验结果「不一致」?

NIRO科研喵  · 公众号  ·  · 2024-11-21 07:30
    

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作者 | NIRO 来源 | NIRO(ID:NIRO-keyanmiao) 编辑 | 澹泊研究僧 我们知道对基因和蛋白定量中qPCR和WB实验是不可缺少的实验,二者相辅相成,相互验证。在理论上,qPCR实验结果和WB实验结果趋势是一致的。 但是如果出现qPCR实验结果和WB实验结果的趋势不一致怎么回事呢? 图片来源: 网络 其实这种实验结果趋势不一致在实际情况中是比较常见的现象!下面我们先从实验技术层面、生物学层面及 数据处理与分析层等 三个方面进行分析。 qPCR实验和WB实验结果不一致的原因分析 1. 实验技术层面的原因 (1) 样品制备与处理 在qPCR中,如果 总RNA样品提取环节 出现失误,如取材到液氮速冻耗时过长导致RNA降解,或在制样时没有保持低温环境、没有有效防范外源性RNA酶的污染,都可能影响RNA的质量和qPCR结果的准确性。 在WB实验中, 蛋白样品制备环节同样至关重 ………………………………

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