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实验解析|外泌体RNA提取的方法介绍和实验流程

实验老司机  · 公众号  ·  · 2024-12-04 07:00
    

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外泌体 RNA 的提取与普通细胞 RNA 提取的差别之处在于我们得把外泌体分离出来然后裂解外泌体才能获取 RNA 。 外泌体可以由体内绝大多数活细胞产生,常见的外泌体 RNA 主要有细胞外泌体 RNA 、血清外泌体 RNA 等,这里我们以细胞外泌体为例,介绍外泌体 RNA 提取的实验步骤和注意事项: 一、实验步骤 1、外泌体的分离 (1)细胞培养上清的收集与预处理 细胞培养上清收集:如果是从细胞培养上清中获取外泌体,先培养细胞至合适的密度。 对于贴壁细胞,用PBS轻轻洗涤细胞2~3次,去除残留的完全培养基(RPMI1640+FBS+PS),更换为无外泌体血清的培养基继续培养24~48h。之后,收集细胞培养上清,转移至离心管中。 对于悬浮细胞,离心收集细胞,用PBS重悬后,转移至无外泌体血清的培养基中培养适当时间后收集上清。 (2)外泌体分离 目前分离外泌体常用 ………………………………

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