血清或血浆的western blot该怎么做？

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用WB 的方 法检测血清或血浆中某种蛋白的含量，最关键的问题是要将样本进行电泳前处理。具体操作步骤如下： 1.常规分离血清或血浆，3000rpm离心15min,取上清。 2.测血清或血浆蛋白浓度。 3.用蛋白裂解液或PBS稀释至所需浓度，一般为5ug/ul（建议 在预实验的时候做几个上样量的梯度进行观察 ）。 4.加入适量loading buffer,100℃煮5min。 注意事项： 注意防止 蛋白降解 。 在应用WB法检测血清或血浆中蛋白时，需要了解该蛋白在血浆或血清中的 丰度 问题，以方便选择适当的上样质量。另外，在应用血清或血浆样品做WB时， 低丰度蛋白检出率极差 ，白蛋白会干扰电泳的分辨率和转膜效率。所以在进行血清或血浆样本的WB实验前，将 白蛋白去除 可以有效的提高低丰度蛋白的检出率，市面上有很多商品化的去除试剂可供选择。 由于血浆或血清中很难找到一个 ………………………………