主要观点总结
本文主要介绍了在WB实验中，使用双内参（传统内参如Actin或Vinculin与Stain-Free技术）来确保实验结果的准确性和可重复性。文章以PNAS上发表的一篇研究为例，解释了为什么在传统内参可能失灵的情况下，采用双内参模式可以确保实验的准确性。同时介绍了Stain-Free技术的优点，并提供了免费申请试用的机会。文章还详细描述了论文中的实验数据和结果。
关键观点总结
关键观点1: 引入双内参概念，提高WB实验准确性
在WB实验中，使用双内参（传统内参和Stain-Free技术）可以确保实验结果的准确性和可重复性。传统内参如Actin在某些特定条件下可能会失灵，而Stain-Free技术作为一种总蛋白内参方法，可以提供第二个内参来评估样品加载的一致性。
关键观点2: PNAS论文案例介绍
文章以PNAS上发表的一篇研究为例，详细解释了如何在黑色素瘤研究中通过WB实验使用双内参来预测黑色素瘤对MAPK抑制剂的反应。这项研究揭示了AMBRA1蛋白水平的重要性，并为开发新的治疗策略提供了可能的靶点。
关键观点3: 论文中Figure展示的数据结果
文章展示了论文中的几个关键Figure，这些Figure通过WB技术的应用，证实了AMBRA1在黑色素瘤对MAPK抑制剂抗性中的作用，并揭示了AMBRA1与FAK1信号通路之间的联系。
文章预览
✦ • ✦ 做 WB 的同学都知道用 Actin 条带作为内参来反映 WB 实验的上样量和结果的可靠性，可你是否知道， Actin 在一些特定条件下也会「失灵」？ ✦ • ✦ 近期， PNAS 上刊发了一篇题为 AMBRA1 levels predict resistance to MAPK inhibitors in melanoma 的论文通过大量 WB 「双内参」 来精准检测 AMBRA1 和 FAK1 的蛋白表达水平，以确保实验结果的准确性和可重复性。从而揭示了 AMBRA1 蛋白水平是预测黑色素瘤对 MAPK 抑制剂反应的重要生物标志物，并为开发针对 MAPK 抑制剂抗性的新治疗策略提供了可能的靶点。 通览文中的 WB 数据结果，其中之一的内参就是我们常用的看家蛋白（文中分别使用了 Actin 或Vinculin 或 β-tubulin），另外一个固定使用的 内参是 Stain-Free 。采用 「看家蛋白」+「Stain-Free」的双内参模式为 WB 实验数据保驾护航。 从文献中的图片结果来看，也是「赏
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