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富有挑战性的蛋白纯化-膜蛋白(二)

生命科学技术摘集  · 公众号  ·  · 2024-10-19 08:57

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前面介绍了膜蛋白的表达筛选到细胞膜的分离,详见 富有挑战性的蛋白纯化-膜蛋白(一) 。本期将介绍膜蛋白的溶解、纯化及后续的研究流程。 溶解是整个膜蛋白质制备过程中最关键的步骤。膜蛋白质的疏水表面和脂类分子的疏水尾部都埋藏在去污剂微胶束的内部,而亲水部分则同水溶液的环境接触。去污剂可以有效的打破脂类-膜蛋白质、蛋白质-蛋白质之间的相互作用,将膜蛋白质从它们所处的自然环境(脂膜)中提取至水溶性环境。去污剂可以打破脂双层,并将膜蛋白质和脂类包裹进去污剂微胶束中。因此可以用于蛋白质的分离。在溶解膜蛋白之前需要对去污剂的种类和浓度进行筛选,以建立最适合的制备条件。 去污剂和CMC 去污剂是一类两性分子,具有极性(亲水)头和非极性(疏水)尾。极性部分可以是非离子,阴离子,阳离子或两 ………………………………

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