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手把手教学|细胞毒性检测法(Calcein-AM/PI双染法)

实验老司机  · 公众号  ·  · 2024-11-05 07:00
    

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细胞毒性检测法(Calcein-AM/PI双染法)是一种常用的细胞活力和毒性评估方法。其原理基于细胞膜的完整性和代谢活性两个关键指标。在实验中,通过使用两种荧光染料Calcein-AM和PI(Propidium Iodide),可以快速准确地评估细胞的状态。 Calcein-AM是一种脂溶性的非荧光染料,可以穿过完整的细胞膜进入细胞内部。在细胞内,Calcein-AM会被细胞内的酯酶水解成为高度荧光的Calcein。只有活着的细胞才能将Calcein-AM水解成Calcein,因此高荧光信号表明细胞的代谢活性和细胞膜完整性良好。而PI是一种核酸染料,只有在细胞膜受损时才能进入细胞内结合DNA并发出红色荧光。因此,当细胞膜受损时,PI会进入细胞并与DNA结合,发出红色荧光信号。 通过同时观察Calcein的绿色荧光和PI的红色荧光,可以区分出三种细胞状态:活着的细胞(只有绿色荧光),死亡的细胞(只有 ………………………………

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