新型HEK293细胞AAV包装工艺研究实例

主要观点总结

本文介绍了新型HEK293细胞AAV包装工艺研究实例，通过使用乐纯生物的LePhinix® EZG Pro台式生物反应器和自研的TinnBio自控软件，实现AAV高表达滴度、高体积培养。文章详细阐述了培养参数、设备与工艺、培养小Tips、数据分析等内容。

关键观点总结

关键观点1: 新型HEK293细胞AAV包装工艺研究

使用乐纯生物的LePhinix® EZG Pro台式生物反应器进行细胞培养，通过自研的TinnBio自控软件实现对搭载玻璃罐的精准控制，实现高表达滴度、高体积的AAV包装。

关键观点2: 培养参数和设备

研究采用康晟生物自主研发的Wayne293®瞬转培养基，培养悬浮细胞Wayne® LVPro HEK293。LePhinix® EZG Pro台式生物反应器参数设置包括接种前玻璃罐的保压测试及灭菌梳理，以及预培养参数。

关键观点3: 培养过程中的关键因素

悬浮培养过程中，AAV转染的接种密度、转染细胞密度、转染时间等变量因素是决定AAV产量的关键。

关键观点4: 数据分析及结论

通过几批玻璃罐内包装AVV实验数据，得出结论：转染第三天AVV滴度稳定表达，对比台式反应器控制200rpm和220rpm批间差异不大，说明台式反应器控制精准，可更好的实现293细胞AAV包装工艺优化，提升病毒产量。

关键观点5: 关于乐纯生物和BLA

乐纯生物是医药行业中上游工艺全链条头部供应商，使命愿景是提供高品质的生物工艺解决方案。BLA是生物制药国产化推进联合会，致力于助推生物制药国产化核心的建立、研发制造安全有效的中国生物药以及推进中国生物医药产业高质量发展。

文章预览

作者：乐纯生物（BLA联合发起单位） 早期AAV（Adeno-associated virus,简称AAV — 腺相关病毒）产品的病毒载体培养方式多采用贴壁培养。但随着工艺的提升，悬浮培养能更好地满足生产工艺的放大升级，故此， 由贴壁培养转向悬浮培养的293T细胞系 成为了新型趋势。 本文分享一则新型HEK293细胞AAV包装工艺研究实例，主要基于 乐纯生物 LePhinix ® EZG 台式生物反应器中Pro款型号，即 ： LePhinix ® EZG Pro 台式生物反应器 ，通过 自研的TinnBio自控软件 实现对搭载玻璃罐的精准控制，实现AAV高表达滴度、高体积培养。   设备与工艺 培养参数 本研究采用乐纯生物集团旗下 康晟生物自主研发的Wayne293 ® 瞬转培养基 ，培养悬浮细胞Wayne ® LVPro HEK293。 LePhinix ® EZG Pro 台式生物反应器参数设置如下表1所示，接种前，需对玻璃罐进行保压测试及灭菌梳理，再加入Wayne293 ® ………………………………