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手把手教学|细胞增殖检测法:EdU染色

实验老司机  · 公众号  ·  · 2024-10-11 07:11
    

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EdU(5-Ethynyl-2'-deoxyuridine)染色是一种新型的细胞增殖检测方法,用于标记和检测处于DNA合成期(S期)的细胞,以反映细胞的增殖情况。 一、原理 EdU是一种胸苷类似物,能够在细胞的S期被掺入到正在合成的DNA链中,取代天然的胸腺嘧啶脱氧核苷(Thymidine)。这意味着EdU只能在细胞正在进行DNA复制(即处于S期)时被掺入细胞的DNA中,因此,EdU的掺入标志着细胞正在增殖。一旦EdU被掺入到DNA中,通过一种称为“点击化学”(Click Chemistry)的铜催化叠氮-炔反应,可以将荧光标记的叠氮物与EdU中的炔基共价结合。 这种反应高效、快速,并且在细胞内的非损伤环境下进行。反应后,DNA中的EdU就会带有荧光标记,能够在荧光显微镜或流式细胞仪下检测到。通过荧光显微镜或流式细胞仪,研究者可以定量测定EdU掺入量,从而评估细胞增殖情况。荧光强度与细 ………………………………

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