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“蛋白”是怎么定量的?

医药速览  · 公众号  ·  · 2024-09-04 08:30

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蛋白质含量可从它们的物理化学性质,如折射率、比重,紫外吸收、染色等测定而得知; 或用化学方法,如定氮、双缩脲反应、 folin-酚试剂反应、BCA法等方法来测定。 01    比色法 蛋白定量常使用的方法是比色法,通常用于总蛋白的定量分析。根据蛋白和比色试剂的结合,可以将比色法分为:蛋白-染料结合法和蛋白-铜螯合化学试剂法。前者对应的典型蛋白定量比色法是考马斯亮蓝G250染料结合法,后者则包括双缩脲法,Lowry法,二喹啉甲酸(BCA)法。 1、Bradford法 Bradford法原理是在酸性溶液中,考马斯亮蓝G250通过与蛋白质中的碱性氨基酸(精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合,使染料的最大吸收峰位置由488nm变为595nm,颜色从棕红色变为蓝色。结合到蛋白质分子上的染料数与蛋白所带正电荷成正比,通过颜色的强弱即可测定蛋白质浓度的高低,因此可以 ………………………………

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