专栏名称: 科研根号三
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获得某一个蛋白的互作蛋白11种方法!

科研根号三  · 公众号  ·  · 2024-11-28 17:37
    

主要观点总结

本文主要介绍了研究蛋白质-蛋白质相互作用的各种方法,包括免疫沉淀、免疫共沉淀、GST pull-down等,并探讨了如何结合使用这些方法以更准确地了解蛋白互作情况。还介绍了一些常用的蛋白质互作数据库和文献查询方法。

关键观点总结

关键观点1: 研究蛋白质-蛋白质相互作用的方法

[u'\u514d\u75ab\u6c89\u6dc0(IP)', u'\u514d\u75ab\u5171\u6c89\u6dc0(Co-IP)', u'GST pull-down', u'Far-Western Blotting', u'\u9175\u6bcd\u7b5b\u5e93', u'\u86cb\u767d\u8d28\u82af\u7247', u'\u8868\u9762\u7b49\u79bb\u5b50\u5171\u632f(SPR)', u'\u751f\u7269\u819c\u5e72\u6d89(BLI)', u'\u90bb\u8fd1\u86cb\u767d\u6807\u8bb0(BioID)']

关键观点2: 如何选择和结合使用蛋白互作研究方法

[u'\u5148\u901a\u8fc7\u6587\u732e/\u6570\u636e\u5e93\u67e5\u627e\u76ee\u7684\u86cb\u767d\u7684\u4e92\u4f5c\u86cb\u767d\u4fe1\u606f', u'\u8003\u8651\u4f7f\u7528COIP\u7814\u7a76\u4f53\u5185\u86cb\u767d\u4e92\u4f5c\uff0c\u4f46\u8981\u6ce8\u610f\u53ef\u80fd\u7684\u4e0d\u9002\u5408\u60c5\u51b5', u'\u7528GST pull-down\u68c0\u6d4b\u86cb\u767d\u4e4b\u95f4\u7684\u76f4\u63a5\u4e92\u4f5c\u5173\u7cfb', u'\u9175\u6bcd\u53cc\u6742\u4ea4\u9002\u5408\u7814\u7a76\u86cb\u767d\u4e92\u4f5c\uff0c\u80fd\u68c0\u6d4b\u5230\u5fae\u5f31\u7684\u6216\u6682\u65f6\u7684\u76f8\u4e92\u4f5c\u7528', u'\u6839\u636e\u9700\u8981\u9009\u62e9\u5176\u4ed6\u5b9e\u9a8c\u65b9\u6cd5\u8fdb\u884c\u9a8c\u8bc1\uff0c\u5982\u86cb\u767d\u8d28\u82af\u7247\u7b49']

关键观点3: 蛋白质互作数据库和文献查询方法

[u'\u4ecb\u7ecd\u4e86\u4e00\u4e9b\u5e38\u7528\u7684\u86cb\u767d\u8d28\u4e92\u4f5c\u6570\u636e\u5e93\uff0c\u5982STRING\u3001IID\u3001BioGRID\u3001HPRD\u7b49', u'\u67e5\u8be2\u6570\u636e\u5e93\u53ef\u4ee5\u83b7\u5f97\u86cb\u767d\u7684\u4e92\u4f5c\u7f51\u7edc\u3001\u4e92\u4f5c\u8bc1\u636e\u7b49\u4fe1\u606f', u'\u901a\u8fc7\u6587\u732e\u67e5\u8be2\u53ef\u4ee5\u83b7\u5f97\u76ee\u6807\u86cb\u767d\u7684\u4e92\u4f5c\u86cb\u767d\u4fe1\u606f\uff0c\u8fdb\u884c\u9a8c\u8bc1']


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蛋白质-蛋白质相互作用是生物体重要的生命过程之一,涉及到细胞信号转导、细胞结构组装、抗原-抗体识别等诸多生理现象。 获取某一个蛋白的互作蛋白有哪些方式?这么多实验该怎么选择? 不慌,一篇文章带你盘点清楚,从各种蛋白互作实验原理到具体研究中该选择哪种实验验证,看完包你明明白白! 一、常见的蛋白互作方法盘点 1)免疫沉淀(IP) 免疫沉淀IP是利用抗体特异性反应富集纯化目的蛋白的一种方法,可用于目的蛋白的定性和定量分析。 IP实验原理 将含有目的蛋白的样品溶液与特异性抗体结合,该抗体的Fc片段又能结合到protein A/G上,protein A/G(结合了protein A和protein B的IgG结合结构域,具有与IgG的Fc片段特异性结合的能力,可用于抗体的亲和纯化。)通常会固定在琼脂糖颗粒或磁珠上,进而吸附目的蛋白,后续再通过离心收集、洗 ………………………………

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