WB 内参 β-actin、GAPDH 也会「出错」？这一点千万注意

文章预览

又是一年毕业季，师兄师姐们都着急给文章找个期刊。忐忐忑忑一个多月，文章终于有了审稿意见。 好消息：没被拒，需要修； 坏消息：需要修的包括 WB 实验。 看似完美的 WB 条带，哪里出了问题？ 千辛万苦搞定了 WB 条带非特异、背景深、显色过曝……却忽略了内参的问题， 甚至差点出现 假阳性 。除了 β-actin 和 GAPDH，原来在一些实验上 （如神经细胞） 有更好的内参选择！ 在最新发表在神经领域一区 Neurobiology of disease 的创新性研究中，研究者 基于行为学分析并结合大量 WB 实验（利用 Stain-Free 免染总蛋白作为 WB 内参） ，表明 Ts66Yah（唐氏综合征）小鼠模型中，随着年龄的增长，氧化还原平衡、蛋白质平衡、应激反应、代谢通路、程序性细胞死亡和突触可塑性的调控变化，为理解衰老相关的脑疾病提供新的理论基础 [1] 。 研究方法和思路学 ………………………………