Nat. Methods | 通过ORFtag在哺乳动物细胞中进行蛋白质组规模的标记和功能筛选

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大家好，今天推荐一篇发表在 Nature Methods 上的文章，题目为 “Proteome-scale tagging and functional screening in mammalian cells by ORFtag” ，通讯作者是四 位来自澳大利亚维也纳大学的科学家，第一 位是 Julius Brennecke  ，研究方向为真核生物基因组和 RNA 通路；第二 位是 Ulrich Elling ，研究方向为基因组和测序；第三 位为 Alexander Stark  ，研究方向为转录组测序；第四 位为 Stefan L. Ameres  ，研究方向为转录组对基因表达的影响。 对蛋白质功能的研究十分重要，目前对蛋白质功能研究的途径主要有两种，一种是基于基因丧失或敲除，例如CRISPR-Cas9和CRISPRi，但往往受到敲除致死或者一些回补机制的影响，另一种是提高蛋白质表达的丰度进行鉴定，依赖于开放阅读框(open reading frame, ORF)文库(ORFeomes)的传递和表达，不仅成本高且难以维护，而且由于DNA合成、克隆、病毒包 ………………………………