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来源：分子庄园、IVD网 一、簇的生成(Cluster Generation) 1、桥式PCR 1）文库结合在芯片上 在Illumina测序平台的流通池(Flow cell)表面，固定了无数条分别与文库接头中P5和P7互补的寡核苷酸链(P5和P7各只有一种，从下到上都为5´→3´方向，用于延伸)。 变性后形成的单链化的文库DNA片段进入流通池后，与P5/P7互补结合(一个双链文库的两条链，一条链为P5结合，另一条链为P7结合，因为固定在芯片上的P5和P7的种类和方向决定)。 因为文库稀释后浓度足够低，可以认为文库片段均匀的结合在流通池表面，每个片段结合的位置相距足够远，从而保证桥式PCR后形成的一个 Cluster 为单克隆，否则测序时会导致信号叠加而不能识别。 2）第一轮复制，清洗掉模板文库 往芯片加入 dNTP 和聚合酶。聚合酶会产生一条与文库模板互补的新链。加入NaOH，使DNA解链，冲洗掉没有种在
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