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qPCR实验中,除了Ct值,还需要看扩增曲线和溶解曲线吗?

NIRO科研喵  · 公众号  ·  · 2024-07-08 07:30

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图片来源:网络 近期分享了 《 qPCR实验中经常忽略的实验细节?你有被cue了吗? 》一文,很多小伙伴反馈,他们在实际操作中经常遇到一个令人困惑的现象: “Ct值表现相当理想,扩增曲线与熔解曲线却时常展现相当个性,如扩增曲线出现折线不呈现S型扩增曲线,而熔解曲线则出现双峰乃至多峰,这些异常现象无疑给实验结果的解读带来不小的挑战”。 图片来源:网络 所以,在解读qPCR实验结果时,你是否只关注了那个看似简单的Ct值(或称Cq值)呢?实际上,除了Ct值,扩增曲线和熔解曲线同样不容忽视,它们是全面评估实验结果准确性和可靠性的关键要素。 为什么Ct值只是冰山一角? Ct值,即循环阈值,是qPCR反应中荧光信号达到设定阈值时所对应的循环数。它常被用来估算起始模板的量,因为Ct值与模板浓度的对数成反比。然而,Ct值仅仅是一个 ………………………………

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