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内含肽标签:提高可溶性表达和简化蛋白纯化

生命科学技术摘集  · 公众号  ·  · 2024-10-13 07:57

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01 摘要 重组蛋白在 E.coli 中表达的主要问题是未折叠和无活性的包涵体的积累,特别是在高产菌株中。一个合适的解决方案是通过增溶标签进入可溶性细胞质。利用具有自裂能力的内含肽,不仅增加蛋白可溶性表达,还简化了它们的纯化过程。目标蛋白很容易从纯化标签中分离,而不需要添加肠激酶等蛋白酶或用各种化学物质处理。本综述收集了与使用内含肽标签进行可溶性表达或蛋白纯化相关的论文,并对其表达条件和纯化工艺进行了讨论,以期分别提高可溶性表达和内含肽裂解的效率。 02 前言   E.coli 作为最简单和最便宜的表达系统被广泛用于重组蛋白表达。然而,在该系统中,高产重组蛋白的表达会导致未折叠和无活性蛋白形成包涵体。有两种策略来克服这一问题:进入可溶性细胞质产物或包涵体重新折叠。然而,由于包涵体的有效折叠没 ………………………………

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