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CRISPR文库筛选操作步骤

生命科学技术摘集  · 公众号  ·  · 2024-07-16 08:35

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CRISPR文库筛选技术的出现,使得科学家可以在基因组级别进行精确的功能研究。通过构建 CRISPR文库,可以对大量基因进行系统的筛选和功能研究。在疾病治疗、农业改良和生物工程等领域具有广泛应用前景。通过筛选和鉴定特定的基因和途径,科学家可以更好地理解生物体的运作机制,揭示潜在的治疗靶点和优化生物工程过程。鉴于 CRISPR/Cas9 高通量文库筛选技术的强大功能,可以预见未来其将得到前所未有的发展和应用。 CRISPR文库筛选操作步骤 1. Cas9 病毒包装 (1) 转染前约 24 小时,将 4-5×10^6 Lenti-X 293T细胞/10 cm 平板接种在8 ml 完全培养基中。在37℃、5% CO₂ 条件下培养过夜。转染时,细胞应达到80-90%的汇合度。 (2) 将转染混合物在室温下混合并孵育培养 10 分钟,以形成复合物。孵育 10 分钟后,离心 2 秒,使液体到达管底部。 (3) 将转染复合物溶 ………………………………

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