Cell | Jennifer Doudna实验室CRISPR-Cas9优化新思路——加速DNA解旋可增强基因编辑效率

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撰文 | 木兰之枻 CRISPR-Cas9系统是当下基因编辑的主流技术，在基础研究和临床转化领域具有广泛的应用前景。这其中SpCas9核酸酶最早被应用于真核生物的基因编辑研究，也是CRISPR-Cas系统中的“顶流” 【1，2】 。考虑到SpCas9的PAM序列局限性及在细胞内易聚集且热稳定性差等不足，研究者相继开发出多种不同类型的Cas9如GeoCas9以拓展适用场景 【3，4】 。与SpCas9相比，GeoCas9热稳定性更高，更适合通过核糖核蛋白 （RNP） 复合物的形式递送至细胞内开展基因编辑研究，这能促进CRISPR-Cas9系统在临床治疗中的应用 【5】 。不过哺乳动物细胞中GeoCas9的基因编辑效率偏低，不利于其广泛应用。为解决这一难题，研究者借助细菌内的蛋白定向进化系统对GeoCas9进行优化，开发的突变体iGeoCas9具有更高的基因编辑效率且热稳定性不受影响。尽管如此，iGeoCas9编辑效率提 ………………………………