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作者 | NIRO 来源 | NIRO(ID:NIRO-keyanmiao) 编辑 | 澹泊研究僧 WB实验其实很简单,并不那么“玄学”,之所以被冠名“玄学”称号, 是因为我们总在很多实验细节中疏忽而导致条带异常。虽然每个实验步骤都知道,但是每个步骤中涉及到的试剂又比较多,每个试剂又有不同的特性,加多加少其结果又不一样,比如抗体加多会导致高背景和非特异性条带;加少则会导致条带比较弱或无信号。 图片来源: 网络 在转膜过程中,「甲醇」是常用的化学试剂之一。 那你知道为什么转膜液中要加甲醇吗?而不是加其他试剂呢? 图片来源: 网络 在WB实验中, 甲醇可以促进SDS与蛋白质分离。 在转膜液中,SDS用于增加蛋白的水溶性,促进蛋白在转膜液中泳动。为了将蛋白质顺利转移到膜上,需要去除蛋白质上的SDS。甲醇能够去除部分SDS,帮助蛋白质恢复与膜的结
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