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原来WB的最大问题出在这里

医药学术  · 公众号  ·  · 2025-01-09 12:43
    

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在当今的生命科学研究领域,蛋白质印迹法(Western Blot,WB)作为一种常用且关键的实验技术,被广泛应用于蛋白质表达水平的检测。然而,深入探究其应用过程,我们会发现,WB存在很多问题,费事费力费钱还不一定能做出来,小编有时候都觉得这项检测应该被淘汰了!但存在即合理。各位小伙伴觉得呢? 其实,我们遇到的很多WB问题可能都是出在实验设计上 为什么这么说呢? 首先, 传统观念中,管家蛋白(如GAPDH、β-actin、 Tubulin )常被用作内参,认为其表达量相对稳定。所以大家都会千方百计的想要把内参跑平,但是根据最近发表的这篇文献( Resolving the current controversy of use and reuse of housekeeping proteins in ageing research: Focus on saving people’s tax dollars )和一些既往的研究表明: 在不同的生理状态、细胞类型以及实验条件下,管家蛋白的表达并非绝 ………………………………

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