实验十五 | 实时荧光定量PCR (知识分享）

文章预览

作者 | 易继财等， 来源 | 基因工程原理与实验 编辑 | 澹泊研究僧 实时荧光定量PCR，又称定量PCR、qRT-PCR、RT-qPCR或qPCR，是生命科学研究中极为重要的技术，也是快速检测目的基因表达水平的首选方法。该技术基于常规PCR技术，旨在实现对核酸的绝对或相对定量。 其 基本原理 如下: 在PCR体系中添加与DNA产物特异结合的荧光染料或带有荧光标记的特异性探针，随着PCR的进行，扩增常务逐渐累积，荧光信号强度与其数量成比例增加。每一轮PCR循环后记录一次荧光强度信号，通过检测荧光型号强度的变化，实时追踪PCR中产物的动态变化，并能够反映扩增产物实时变化的荧光曲线。 根据荧光曲线和已知浓度的DNA扩增或呈组成性表达的内源基因扩增，对待样品中目的基因的初始模板数量进行绝对或相对定量。相比于常规PCR技术，qPCR技术不仅能够实现目的 ………………………………