【分析】集成化前处理技术助力高灵敏度蛋白互作组解析

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蛋白质是生命活动的实际执行者，解析蛋白质相互作用网络对于深刻理解生命活动过程以及疾病发生发展机理至关重要。亲和纯化-质谱（Affinity purification – mass spectrometry, AP-MS）是一种经典的分析策略，已被广泛应用于解析蛋白复合物的组成以及其动态变化。传统的AP-MS样品前处理流程包括基于多肽探针或者标签抗体的亲和富集、非特异性吸附蛋白的去除、蛋白酶解、洗脱以及除盐。这一过程不仅步骤冗长，而且由于涉及到多步大体积的溶液置换，样品损失较大，因此通常需要数百微克乃至毫克级别的细胞裂解物。灵敏度的限制使得传统的AP-MS工作流程较难应用于样品量较少（如临床样本）或者需要昂贵的长链多肽作为配体时的蛋白相互作用分析实验。 针对上述问题， ………………………………